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总蛋白提取试剂盒（2D电泳用）
产品编号: BB-3181
产品系列: 蛋白提取试剂盒
- 产品描述
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注意事项：● 本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。产品简介：我公司总蛋白提取试剂盒（2D 电泳用）适用于从各种原代或传代细胞和各种实体组织，如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等哺乳动物组织中提取总蛋白。提取过程简单方便，可在1 小时内完成。该试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。本试剂盒含有的独特配方能够溶解细胞膜包括细胞质膜和核膜。提取的蛋白直接用于双向电泳。产品特点：1、使用方便，从细胞，组织中提取蛋白不需经过研磨、反复冻融、超声破碎等前处理。2、将蛋白提取的时间缩短至 30 分钟-1 小时。3、含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。4、紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。5、蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含7 种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。试剂盒以外自备试剂和仪器● 移液器、吸头 ● 离心机及离心管● 涡旋振荡器 ● 冰箱，冰盒使用方法：使用注意事项：1. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。2. 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。3. 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。细胞总蛋白提取：1. 提取液制备：每 500ul 的总蛋白提取液中加入2ul 蛋白酶抑制剂混合物和2ul磷酸酶抑制剂混合物，混匀后备用。2. 取 5-10×106 个细胞①，在4℃，1000rpm 条件下离心5-10 分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。3. 用冷 PBS 洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。4. 每 5×106 个细胞中加入500ul 的总蛋白提取液，混匀后，振荡15-20 分钟。5. 在 14000rpm 条件下离心15 分钟。6. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到总蛋白。7. 将上述蛋白提取物定量②后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验③。注：① 细胞数量根据实验情况调整，每次的裂解液用量并不是一定的，请根据实际情况调整。② 建议用 BCA 法进行蛋白定量。③ 蛋白样品－80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被细菌污染。组织总蛋白提取：1. 提取液制备：每 500ul 的总蛋白提取液中加入2ul 蛋白酶抑制剂混合物和2ul磷酸酶抑制剂混合物，混匀后备用。2. 取 100mg 组织样本剪碎，加入总蛋白提取液，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体①。3. 将组织匀浆吸入干净离心管中，在 10000rpm 条件下离心5 分钟。4. 将上清吸入另一干净离心管，即可得到总蛋白。5. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
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