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细菌总蛋白提取试剂盒(2D电泳用)

产品编号: BB-3182

产品系列: 蛋白提取试剂盒

  • 产品描述
  •  

    储存条件:
    蛋白提取液A 室温保存;蛋白提取液B 和蛋白酶抑制剂-20℃保存。
    有效期:
    一年。
    注意事项:
    ● 本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
    ● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
    ● 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
    ● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
    ● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
    产品简介:
    我公司细菌总蛋白提取试剂盒(双向电泳用)可以从各种原核细菌样本中提取总蛋白,提取过程简单方便。该试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高质量的蛋白提供了保证。提取的蛋白用于双向电泳。如需要用于报告基因检测、SDS-PAGE 电泳检测、Western blotting、凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活分析等下游实验的试剂盒,请联系本公司。
    试剂盒以外自备试剂和仪器
    ● 移液器、吸头 ● 离心机及离心管
    ● 涡旋振荡器 ● 冰箱,冰盒
    使用方法:
    使用注意事项:
    1. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
    2. 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
    3. 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。
    4. 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
    5. 本试剂盒提取的蛋白样本可直接用于 2D 电泳,也可根据需要进行TCA/丙酮沉淀处理后使用。
     
    1. 裂解液的准备:根据所需要提取的样本量,每 500ul 蛋白提取液中A 加入5ul试剂B 和2ul 蛋白酶抑制剂混合物,充分混匀后置冰上备用。
    2. 在 4℃ 12000RPM 条件下将菌液离心5min,弃上清,尽量吸干剩余液体,收集菌体,用PBS 洗菌体2 次。若为冷冻菌体直接进行下面操作步骤即可。
    3. 按每 20mg 湿重菌体样本加入500ul 裂解液,吹打混匀,冰上放置30 分钟,间隔一段时间振荡。(选做步骤:300w,10s 超声/10s 间隔条件下冰浴超声至菌液变清。若不做,请延长裂解液作用时间至2 小时。)
    4. 在 4℃ 12000RPM 条件下将提取液离心5 分钟。
    5. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管,即可得到细菌总蛋白。
    6. 将上述蛋白提取物定量①后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
    注:
    ① 建议用 Bradford 法或Lowry 法进行蛋白定量。