胞浆蛋白提取试剂盒（2D电泳用）-上海邦奕生物科技有限公司

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胞浆蛋白提取试剂盒（2D电泳用）

产品编号: BB-31812

产品系列: 蛋白提取试剂盒

产品描述

储存条件：

-20℃保存。

有效期：

一年。

产品简介：

本试剂盒提供全套试剂，适用于从细胞和动物组织制备胞浆蛋白。提取过程简单方便，可在1 小时内完成。制备的胞浆蛋白不仅纯度高，保持天然活性，而且绝少交叉污染。提取的蛋白可直接用于双向电泳。

注意事项：

● 本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。

● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。

● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。

● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。

● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

使用方法：

使用注意事项：

1. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。

2. 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

细胞胞浆蛋白提取：

1. 提取液制备：每 500ul 的胞浆蛋白提取液中加入2ul 蛋白酶抑制剂混合物，混匀后备用。

2. 取 5-10×106 个细胞①，在4℃，2500rpm 条件下离心5-10 分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。

3. 用冷 PBS 洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。

4. 每 5×106 个细胞中加入500ul 的胞浆蛋白提取液，混匀后，振荡15-20 分钟。

5. 在 14000rpm 条件下离心15 分钟。

6. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到胞浆蛋白。

7. 将上述蛋白提取物定量②后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验③。

注：

① 细胞数量根据实验情况调整，每次的裂解液用量并不是一定的，请根据实际情况调整。

② 建议用 BCA 法进行蛋白定量。

③ 蛋白样品－80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被细菌污染。

组织胞浆蛋白提取：

1. 提取液制备：每 500ul 的胞浆蛋白提取液中加入2ul 蛋白酶抑制剂混合物，混匀后备用。

2. 取 100mg 组织样本剪碎，加入胞浆蛋白提取液，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体①。

3. 将组织匀浆吸入干净离心管中，在 14000rpm 条件下离心5 分钟。

4. 将上清吸入另一干净离心管，即可得到胞浆蛋白。

5. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。

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